Венцом собрания являются две наиболее прославленные композиции мастера — «Весна» и «Рождение Венеры», созданные, как предполагают, по мотивам поэмы «Джостра» (Турнир) Анджело Полициано, флорентийского гуманиста и придворного поэта Лоренцо Великолепного. Картина «Весна» представляет, видимо, аллегорию царства Венеры, т.е. царства радости, любви и красоты. Однако в этом произведении нет и тени беззаботного веселья, от него веет поэтической грустью, все персонажи его живут своей, отчуждённой друг от друга жизнью. Под сенью апельсиновых и миртовых деревьев изображена богиня, окружённая свитой: три грации, Меркурий, нимфа и преследующий её Ветер, а на переднем плане Весна в пёстром наряде, легко скользя по земле, рассыпает цветы. «Весна» оставляет двойственное впечатление — она как бы распадается на ряд групп и фигур, из которых каждая в отдельности гораздо выразительнее, чем вся картина в целом
«Рождение Венеры», наоборот, поражает необыкновенной слитностью художественного языка. По зыбкой поверхности моря, подгоняемая лёгким дуновением ветерков-зефиров, скользит раковина, несущая золотоволосую богиню. На берегу Венеру ожидает нимфа, готовая набросить на её обнажённое тело затканный цветами плащ. Образ Венеры — один из наиболее пленительных и типичных женских образов среди созданных Боттичелли: одухотворённое лицо с мечтательно устремлёнными вдаль печальными глазами, хрупкая, удлинённых пропорций фигура, воплощение женственности, чувственной грации и красоты. Изысканная утончённость рисунка Боттичелли сказалась в выразительном абрисе фигуры, выступающей на бледно-бирюзовой поверхности моря и неба, расцвеченной нежно-розовыми лепестками цветов, падающих с высоты. Линия и цвет моделируют форму и определяют эмоциональный строй картины, выдержанной в светлых пастельных тонах. Таким предстаёт в Уффици Сандро Боттичелли — глава художников медичейского круга. Позднее, увлечённый проповедями Савонаролы, Боттичелли впал в аскетизм и, как говорили, сам снёс некоторые свои картины на костёр, разложенный на площади Синьории по приказу фанатичного монаха. Тяжело пережив казнь Савонаролы, художник уже не мог творить с прежней лёгкостью и умер в бедности и одиночестве одиннадцать лет спустя
В Уффици имеются произведения Леонардо да Винчи, но у себя на родине во Флоренции великий мастер представлен значительно слабее, чем в Лувре, где хранится богатейшее собрание его произведений, или в Эрмитаже, обладающем двумя первоклассными картинами. В Уффици находится начатый в 1481 году и незаконченный алтарный образ «Поклонение волхвов», дошедший до нас в виде коричневого подмалёвка. «Поклонение волхвов» характеризует важный этап в творческой биографии мастера — переход к стилю Высокого Возрождения. Но одна (подлинность второй картины Уффици — «Благовещение» — оспаривается большинством авторитетных учёных), да ещё и незавершённая вещь, конечно, не может дать полного представления о характере живописной манеры Леонардо. В какой-то мере этот пробел восполняет осмотр «Крещения» — картины Верроккио, учителя Леонардо да Винчи, где фигура коленопреклонённого ангела с нежным, оживлённым чуть заметной улыбкой лицом и мягкими прядями волос, ниспадающими на плечи, выполнена молодым Леонардо. Говорили, что эта фигура произвела столь сильное впечатление на Верроккио, что он навсегда оставил кисть и с тех пор работал только как скульптор
Раннее Возрождение — лучшая часть экспозиции. Высокое Возрождение гораздо богаче представлено в музее Питти. В Уффици же среди произведений мастеров Высокого Возрождения выделяются «Мадонна Дони» Микеланджело — единственная сохранившаяся станковая картина мастера, картины Рафаэля («Мадонна со щеглёнком», портреты), Тициана («Флора», «Венера Урбинская», «Венера с амуром»), ряд портретов Бронзино, картины Андреа дель Сарто («Мадонна с гарпиями» и др.) и, наконец, замечательный «Портрет Лоренцо Великолепного» Вазари, в котором этому посредственному мастеру неожиданно удалось раскрыть противоречивый характер своей модели. В нашей группе имелись рьяные фотолюбители, которые пытались сфотографировать картины, но этого сделать не удалось, так как в Уффици, как и в большинстве музеев Италии, фотосъёмка не разрешена